TaqポリメラーゼとDNAポリメラーゼの主な違いは、Taqポリメラーゼが耐熱性DNAポリメラーゼであるのに対して、DNAポリメラーゼはDNA分子の合成を触媒する酵素であることです。
TaqポリメラーゼとDNAポリメラーゼは、DNA分子の合成を触媒する2種類の酵素です。
しかし、TaqポリメラーゼはPCRなどの体外系でのDNA合成を担い、DNAポリメラーゼは細胞内でのDNA合成を担っている。
Taqポリメラーゼとは
Taqポリメラーゼは、DNAのPCR増幅に使用される最も一般的なDNAポリメラーゼの一種です。
Taqポリメラーゼの最大の特徴は、耐熱性があることです。
95℃での半減期は40分です。
また、至適温度は72℃で、至適温度では1分間に2〜4キロ塩基を付加する。
広い温度範囲で活性があるため、Taqポリメラーゼはヌクレオチドを付加し、DNAとプライマーがあれば、ミスプライミングや伸長が起こる可能性がある。
図1:Taqポリメラーゼの模式図
さらに、Taqポリメラーゼの名前は、好熱性真正細菌であるサーマス・アクアティカス(Thermus aquaticus)に由来する。
T. aquaticusは温泉や熱水噴出孔に生息する細菌で、TaqポリメラーゼはPCRに必要なタンパク質変性条件(高温)に耐えられる酵素であることが確認された。
そこで、もともとPCRに使われていた大腸菌由来のDNAポリメラーゼに代わって、Taqポリメラーゼが使われるようになった。
DNAポリメラーゼとは
DNAポリメラーゼは、細胞内でDNAの合成を行う酵素です。
DNAポリメラーゼの大きな特徴として、伸長する鎖に5′-3′方向のヌクレオチドが付加されること、合成の開始にRNAプライマー、つまり既存の3′-OH基が必要であることがあげられる。
一般に、真核生物には6種類のDNAポリメラーゼが存在し、それらは、DNAポリメラーゼα、β、γ、δ、ε、ζです。
しかし、DNA複製に関与するのは、α、δ、εポリメラーゼだけです。
他のDNAポリメラーゼはDNAの修復に関与する。
図2: DNAポリメラーゼ
また、原核生物に存在する主なDNAポリメラーゼには、DNAポリメラーゼI、II、III、IV、Vがあり、DNAポリメラーゼIは3′→5′と5′→3′の両方のエキソヌクレアーゼ活性を持っています。
また、DNAポリメラーゼIIは、3′→5′エキソヌクレアーゼ活性のみを有する。
一方、DNAポリメラーゼIIIホロ酵素は原核生物におけるDNA複製の主要な酵素です。
一方、DNAポリメラーゼIVは、非標的変異誘発に関与している。
DNAポリメラーゼVはDNAの修復に関与している。
TaqポリメラーゼとDNAポリメラーゼの類似性
- TaqポリメラーゼとDNAポリメラーゼは、DNA合成を担う2種類の酵素です。
- DNAの3’OH末端にヌクレオチドを付加するのが役割です。
TaqポリメラーゼとDNAポリメラーゼの違い
定義
Taqポリメラーゼは好熱菌Thermus aquaticusから抽出した熱安定性(耐熱性)DNAポリメラーゼ、DNAポリメラーゼは核酸分子という形でDNAの新しいコピーを形成する酵素の一種である。
で発生します。
通常、TaqポリメラーゼはT. aquaticusに、DNAポリメラーゼは原核生物に存在する。
最適温度
Taq ポリメラーゼの至適温度は 72℃、DNA ポリメラーゼの至適温度は 37℃です。
最高気温
Taqポリメラーゼは高温で活性化するが、DNAポリメラーゼは高温で活性化しない。
加工性
Taqポリメラーゼは1分間に2~4キロ塩基を付加し、DNAポリメラーゼは1秒間に15~20ヌクレオチドを付加する。
アプリケーション
原核細胞でDNAを合成するDNAポリメラーゼに対し、TaqポリメラーゼはPCRに使用されます。
結論
Taqポリメラーゼは、T. aquaticusに存在するDNAポリメラーゼIの耐熱性型です。
その至適温度は72℃です。
従って、このDNAポリメラーゼは耐熱性です。
しかし、DNAポリメラーゼは、原核生物の酵素で、細胞内でDNAを合成する役割を担っている。
その至適温度は37℃です。
従って、TaqポリメラーゼとDNAポリメラーゼの主な違いは、その至適温度です。