生細胞と非生細胞の主な違いは、生細胞は成長できるのに対し、非生細胞は死んでいて成長できないことである。
さらに、凍結保存された冷凍細胞は生細胞であり、スナップ凍結された細胞は非生細胞です。
生細胞と非生細胞は、細胞培養における2種類の細胞です。
生細胞と非生細胞の区別は、フローサイトメトリーや様々な染色法を用いて行うことができる。
バイアブルセルとは
生細胞とは、細胞培養の際に増殖することができる細胞のことです。
したがって、生きていることになる。
しかし、実験室内で長期間保存するためには、細胞を凍結させる必要があります。
ここで、培地に欠かせないのがDMSO(ジメチルスルホキシド)です。
DMSOの主な働きは、細胞内の水分をゆっくり取り除き、冷やすときにできる氷から細胞膜の粉砕を保護することである。
また、小器官を氷の形成から保護する。
したがって、DMSOは凍結時に細胞を冷凍保存するクライオプロテクタントとして機能する。
凍結した細胞は、後で解凍し、増殖用培地に入れることができる。
図1 DMSOのイメージ
また、生細胞の計数にはプレートカウント法が広く用いられており、サンプル中の活発に増殖している細胞の数を特定することができる。
プレートカウンティングには、スプレッドプレート法とストリークプレート法の2つの方法があります。
非可逆性細胞とは
細胞培養において、増殖してコロニーを作ることができない細胞を非生細胞という。
しかし、細胞の総数には生細胞と非生細胞の両方が含まれる。
特に、スナップフリージング(ドライアイスで試料を急速凍結する方法)を行った細胞は、急速凍結により細胞膜が破壊され、生細胞ではなくなってしまう。
図2:Oxoid Brilliance UTI寒天培地プレートで培養された尿
臨床的尿路感染症(UTI)患者検体(上)、混合培養検体(下)
フローサイトメトリー法による生細胞と非生細胞の識別には、ステインが関与している。
非生細胞を染色するステインには、トリパンブルー、ニグロシン、エリスロシンBなどがあり、生細胞の細胞膜はこれらのステインを排除しています。
しかし、死細胞や損傷細胞の細胞質には染色剤が入り込む。
さらに、生細胞染色剤は、細胞のメカニズムによって細胞に入り込み、生細胞のみを染色する。
メチレンブルーは生細胞染色剤です。
生細胞と非生細胞の類似性
- 細胞培養において、「生存可能な細胞」と「生存不可能な細胞」の2種類があります。
- さらに、これらは通常の細胞培養にも存在する。
- また、フローサイトメトリーやプレートカウントは、この2種類の細胞を識別するのに役立つ。
生細胞と非生細胞の違い
定義
生きている細胞は「生存細胞」、生きていない細胞は「非生存細胞」と呼ばれ、生存・発達・繁殖が不可能な死んだ細胞を指す。
したがって、これが生細胞と非生細胞の主な違いです。
成長する能力
さらに、生存可能な細胞は成長できるが、生存不可能な細胞は成長することができない。
ライブ・オア・デッド
生存している細胞は生きているが、生存していない細胞は死んでいる。
凍結
生細胞と非生細胞のもう一つの違いは、凍結保護剤で凍結した細胞は生細胞であり、スナップ凍結した細胞は非生細胞であることである。
ステイン
トリパンブルー、ニグロシン、エリスロシンBは非生細胞を染め、メチレンブルーは生細胞を染める。
したがって、これも生細胞と非生細胞の違いです。
結論
生細胞とは、細胞培養で増殖できる細胞であり、非生細胞は細胞培養で増殖できない細胞です。
また、DMSOとともに凍結させることで、細胞の生存能力を維持することが可能である。
しかし、スナップフリージングは細胞膜を破壊してしまう。
したがって、生細胞と非生細胞の主な違いは、細胞培養で細胞を増殖させることができるかどうかということである。