in-situ hybridizationと免疫組織化学の主な違いは、in-situ hybridizationがスライドにマウントした薄い組織切片または細胞中の特定のタンパク質を検出するのに対し、免疫組織化学はDNAまたはRNAの特定の配列または領域を検出することである。
一般に、in-situ hybridizationと免疫組織化学は、組織内の特定のタンパク質やRNA転写産物の細胞発現を局在化させるための貴重な手段です。
In-situ Hybridizationとは？
一般に in-situ hybridization (ISH) は、組織切片内の特定セグメントの核酸の局在を検出する技術です。
従って、組織切片やスライドにマウントした細胞中の特定のDNA、RNA、修飾核酸を検出することができます。
また、in-situ hybridizationでは、試料中に存在する相補的な核酸配列を検出するためのプローブを使用する。
二本鎖DNA（dsDNA）プローブ、一本鎖DNAプローブ（ssDNA）、RNAプローブ（リボプローブ）、合成オリゴヌクレオチドなどが、in-situ hybridizationで用いられる主なプローブのタイプです。
図1: RNA in situ Hybridization – ヒトメラノーマFFPE組織切片
さらに、これらのプローブは、32P、35S、3Hなどの放射性標識や、ビオチン、ジゴキシゲニン、蛍光色素などの非放射性標識で標識されている。
通常、in-situ hybridizationは、微生物学において、微生物の形態や集団構造を検出することができる。
病理学分野では、病原体のプロファイリングや遺伝子発現の異常の検出に重要です。
また、発生生物学におけるin-situ hybridizationの応用として、胚組織における遺伝子発現のプロファイリングがあります。
核型分析、系統分析では、個々の染色体のパターンや染色体異常がin-situ hybridizationで検出できる。
さらに、染色体マッピングにおいても重要です。
免疫組織化学とは？
免疫組織化学（IHC）は、健康や病気における特定の抗原の分布を決定するための抗体の重要な応用です。
従って、特定の腫瘍抗原や癌の検出において重要です。
さらに重要なことは、免疫組織化学は、特定の腫瘍マーカーを用いた良性および悪性腫瘍の検出において重要であることである。
通常、この技術により、細胞の種類や転移の起源を特定することができます。
図2: 免疫染色
免疫組織化学は、モノクローナル抗体やポリクローナル抗体を用いて、組織中の特定の抗原を検出する手法です。
抗体には一次抗体と二次抗体の2種類があります。
一般に、一次抗体は組織試料中の特定の抗原と結合する。
しかし、二次抗体は一次抗体に結合する。
二次抗体には、ビオチンなどのリンカー分子が含まれており、二次抗体の結合を検出するのに役立ちます。
In-situ Hybridizationと免疫組織化学の類似性
- In-situ hybridizationと免疫組織化学は、細胞発現を検出する上で重要な2つのツールです。
- どちらの手法も、薄い組織やスライドにマウントされた細胞の局所的な細胞発現を検出することができる。
インサイチュハイブリダイゼーションと免疫組織化学の違い
定義
In-situ hybridizationとは、生体試料中の特定の核酸配列を局在化するための技術であり、免疫組織化学とは、試料中の特定の抗原を抗体で確認する技術です。
検出
In-situ hybridizationは局在するDNAやRNAを検出し、免疫組織化学は局在するタンパク質を検出する。
意義
通常、in-situ hybridizationは組織切片内の特定の核酸セグメントを正確に局在化する技術であり、免疫組織化学は抗体と抗原の特異的結合を利用して細胞や組織内の特定の抗原を検出・局在化する強力な技術です。
検出方法
In-situ hybridizationは核酸プローブを用いて試料中の相補的な核酸を検出し、免疫組織化学は抗体を用いて試料中の特定のタンパク質を検出・可視化する方法です。
重要性
In-situ hybridizationは、個々の細胞内の特定の核酸配列の検出と正確な局在を可能にし、免疫組織化学は、健康や病気において関心のある抗原の組織分布を決定します。
結論
in-situ hybridizationと免疫組織化学は、組織切片やスライドにマウントされた細胞などのサンプル中の局所的な細胞発現を検出する技術です。
一般に、in-situ hybridizationは特定の核酸の存在を検出し、免疫組織化学はサンプル中の特定のタンパク質の存在を検出する。
したがって、in-situ hybridizationは核酸プローブを用いて目的の核酸とハイブリダイズし、免疫組織化学は抗体を用いて提示タンパク質を検出する。
従って、in-situ hybridizationと免疫組織化学の主な違いは、検出の種類です。
