一次抗体と二次抗体の違いとは?分かりやすく解説!

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一次抗体と二次抗体の主な違いは、一次抗体が特定の抗原に結合するのに対して、二次抗体は一次抗体に結合することです。

一次抗体と二次抗体は、ELISA、ウェスタンブロット、免疫染色など、さまざまなイムノアッセイにおいて重要な2種類の抗体です。

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一次抗体とは

一次抗体とは、ELISAなどのイムノアッセイにおいて、試料中の特定のタンパク質の存在を検出するための第一抗体です。

一般に一次抗体は、マウス、ラット、ウサギ、ヤギなどの動物種を宿主とするモノクローナル抗体やポリクローナル抗体であることが多い。

一次抗体の最も重要な特徴は、試料中の特定のタンパク質中の目的の抗原に特異的に結合することである

Compare Primary and Secondary Antibody 図1:一次抗体と二次抗体

さらに、試料中の特定のタンパク質を特異的に検出することは、ELISA、免疫精製、ウェスタンブロッティング、免疫組織化学、フローサイトメトリーなどの様々なイムノアッセイにおいて重要です。

また、病気の診断、治療薬のモニタリング、創薬や製薬産業における臨床薬物動態学や生物学的同等性試験においても重要です。

二次抗体とは

二次抗体とは、イムノアッセイにおける二次抗体のことです。

サンプル中に存在する一次抗体と結合します。

したがって、二次抗体の主な機能は、サンプル中の特定の抗原に結合する一次抗体を検出することです。

つまり、標的を間接的に検出することになる。

二次抗体の他の大きな特徴は、抗体自体に検出可能なタグが存在することである

Primary vs Secondary Antibody 図2: ELISA

さらに、二次抗体には、一次抗体との結合を検出するために、西洋わさびペルオキシダーゼ(HRP)やアルカリホスファターゼ(AP)などの酵素、蛍光色素などの分子が結合している。

一次抗体と特定のタンパク質との結合を検出することは、試料中に特定のタンパク質が存在することを検出するために重要です。

一次抗体と二次抗体の類似性

  • 一次抗体と二次抗体は、ELISA、ウェスタンブロット、免疫染色に使用される2種類の抗体です。
  • 試料中の特定の抗原を検出するために重要です。

一次抗体と二次抗体の違い

定義

一次抗体とは、精製や検出・測定を目的として、特定のタンパク質やその他の研究対象生体分子と特異的に結合する免疫グロブリンのことである

二次抗体とは、一次抗体や抗体フラグメント(Fc領域やFab領域など)に結合するポリクローナル抗体やモノクローナル抗体のことです。

バインド先

一次抗体は試料中の特定の抗原に結合し、二次抗体は一次抗体に結合する。

バインディング

さらに、一次抗体はタンパク質の抗原に結合し、二次抗体は一次抗体のFc領域またはFab領域に結合する。

重要度

一次抗体は、試料中の特定の抗原の存在を検出します。

一方、二次抗体は、試料中の一次抗体の存在を検出します。

追加

一次抗体は試料に添加する一次抗体で、二次抗体は試料に添加する二次抗体です。

検出

また、一次抗体には検出可能なタグがなく、二次抗体には検出可能なタグがあります

結論

一次抗体と二次抗体とは、ELISAやウェスタンブロットなどのイムノアッセイで使用される2種類の抗体のことで、簡単に説明すると、一次抗体は試料に最初に添加される抗体、二次抗体は試料に添加される抗体です。

一次抗体は、サンプルに最初に添加される抗体です。

一般的には、サンプル中に存在するタンパク質の特定の抗原に結合します。

したがって、一次抗体は試料中の特定の抗原の存在を検出するために重要です。

一方、二次抗体は、試料に添加される二次抗体です。

一次抗体と結合します。

したがって、二次抗体が一次抗体に結合することで、試料中の一次抗体の存在が検出されます。

したがって、一次抗体と二次抗体の主な違いは、結合の種類と重要性です。

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