蛍光顕微鏡とエピ蛍光顕微鏡の主な違いは、蛍光顕微鏡が可視光の代わりに蛍光を利用して画像を生成する光学顕微鏡の一種であるのに対し、エピ蛍光顕微鏡は蛍光体の励起と蛍光の検出が同じ光路で行われる蛍光顕微鏡の一種である点です。
蛍光顕微鏡と顕微蛍光顕微鏡は、可視光の代わりに蛍光を利用して試料を可視化する光学顕微鏡の一種である。
蛍光顕微鏡とは？
蛍光顕微鏡とは、光学顕微鏡の一種で、蛍光を利用して物体を可視化するものです。
蛍光顕微鏡の原理は、特定の波長（または複数の波長）の光を試料に照射し、それが蛍光体に吸収されて、より長い波長の光（すなわち、吸収された光とは異なる色）を放出させるというものです。
蛍光顕微鏡の構成要素
蛍光顕微鏡の構成要素は、光源、励起フィルター、ダイクロイックミラー、エミッションフィルターです。
光源にはキセノンアークランプや水銀灯が使われ、より高度なものでは高出力LEDやレーザーがあります。
さらに、フィルターやダイクロイックビームスプリッターは、蛍光体の励起と発光の分光特性に合わせたものです。
照明光は、分光放射フィルターを使って、はるかに弱い放出蛍光から分離される。
画像は、一度に単一の蛍光体の分布であり、複数の色を持つ画像は、単一色の画像を組み合わせることができます。
図1：内皮細胞
さらに、蛍光顕微鏡には、落射蛍光顕微鏡、共焦点顕微鏡、全反射蛍光顕微鏡などの種類があります。
しかし、最も一般的に使用されている蛍光顕微鏡は、落射蛍光顕微鏡です。
これらの顕微鏡では、蛍光体の励起と蛍光の検出が同じ光路（つまり対物レンズを通る）で行われます。
また、共焦点顕微鏡のように、試料の深さを変えて複数の二次元画像を撮影し、三次元構造を再構成するような高度な蛍光顕微鏡の設計の基礎にもなっている。
エピフルオロレッセンス顕微鏡とは？
落射蛍光顕微鏡とは、蛍光体の励起と蛍光の検出を同じ光路（対物レンズを通して）で行う光学顕微鏡の一種である。
特にライフサイエンス分野で使用される蛍光顕微鏡の大半は、落射蛍光（epifluorescence）方式です。
ここで、励起波長の光は対物レンズを通して試料を照らします。
その対物レンズから、標本が発する蛍光が検出器に集光される。
図2: 蛍光顕微鏡のイメージ図
さらに、ダイクロイックビームスプリッターは、蛍光灯の光を接眼レンズや検出器に透過させ、残った励起光を光源に反射させる波長依存のフィルターとして機能する。
蛍光顕微鏡としては落射蛍光顕微鏡が一般的ですが、落射蛍光顕微鏡は励起光のほとんどが試料を透過するため、S/N比が高くなります。
蛍光顕微鏡と顕微蛍光顕微鏡の類似点
- 蛍光顕微鏡と顕微蛍光顕微鏡は、可視光線の代わりに蛍光を利用した顕微鏡です。
- どちらの顕微鏡も、試料に特定の波長の光を照射すると、蛍光色素が吸収し、より長い波長の光（吸収した光とは異なる色）を放出します。
蛍光顕微鏡と顕微蛍光顕微鏡の違い
定義
有機物や無機物の性質を調べるために、散乱、反射、減衰、吸収の代わりに、あるいは加えて、蛍光を利用する光学顕微鏡のことをいい、平行光線を試料に直接当てて、照明の量を最大にするのが落射蛍光顕微鏡です。
タイプ
通常、蛍光顕微鏡は光学顕微鏡の一種であり、落射蛍光顕微鏡は蛍光顕微鏡の設計図である。
重要性
蛍光顕微鏡は有機分子や無機分子の性質を調べるのに重要であり、落射蛍光顕微鏡は蛍光顕微鏡の設計の基礎として重要です。
意義
蛍光顕微鏡は光学顕微鏡に比べてより高度な機能を持ち、落射蛍光顕微鏡は高い信号対雑音比を持つ。
結論
蛍光顕微鏡と顕微蛍光顕微鏡は、可視光の代わりに蛍光を利用して画像を照明する光学顕微鏡です。
しかし、蛍光顕微鏡の方が高性能であるのに対し、落射蛍光顕微鏡はS/N比が高いという特徴があります。
蛍光顕微鏡では、蛍光色素の励起と蛍光の検出が同じ光路で行われます。
したがって、蛍光顕微鏡と落射蛍光顕微鏡の主な違いは、顕微鏡の設計にあります。
