異なる生物試料の染色には、異なるステインが使用されます。
染色剤は、生体試料中の特定の物質と反応し、その物質に特定の色を与えます。
アセトカルミンは、染色体内の核酸を実証するために使用される染色体です。
また、アセトカルミンが核酸の染色体としてより適している理由は他にもいくつかあります。
それらについては、この記事で説明します。
ステイニングとは
染色とは、生物試料の顕微鏡観察において、顕微鏡下の生物試料のコントラストを強調するために用いられる技術です。
特定の細胞集団、細胞小器官、DNA、タンパク質、炭水化物、脂質など、生体組織の構造を浮き彫りにすることができます。
染色剤には、合成化学物質と動植物由来の天然化学物質があります。
以下に、染色方法について説明する。
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- 単一染色 – 単一染色では、1つの染色剤を用いて生物試料全体を単一の色に染める。
- 2.二重染色:2つの染色剤を用いて、特定の小器官や特定の部位を染色する方法。
- 3.多重染色 – 試料中の細胞小器官などの構成要素を特異的に染色するために、2種類以上の染色剤を使用する方法。
アセトカルミンとは
カーマイン(Carmine)は、コクテンカメムシという昆虫から抽出される塩基性染料です。
アセトカルミンは、カルミンと氷酢酸を混合することで生成される。
有糸分裂の各段階におけるスーパーコイル染色体の可視化に使用されるDNA特異的染色剤です。
アセトカルミンステインの調製
- 10gのカルミンを45%氷酢酸1Lに溶かす。
- アルミニウム顆粒を加え、24時間還流する。
- 3.暗色の瓶に濾過し、4℃で保存する。
- 塩化第二鉄を添加すると染色性が向上する(% acetocarmine 100 mL に対して 10 %塩化第二鉄溶液を 5 mL 添加)。
なぜアセトカルミン染色は分裂染色体の研究に使われるのか?
一般にアセトカルミンは単一染色に使用される色素です。
核と細胞質の両方を染めることができる。
細胞質を無色にしたまま染色体を染めるには、まず生体試料をホルムアルデヒドで処理し、次に塩酸で60℃、適切な加水分解時間をかけて加水分解する。
最後に、アセトカルミンで処理することができます。
アセトカルミンは弱酸性条件下(pH4-5)で大きな色素凝集体を生成する。
アセトカルミンを用いた染色によるタマネギの根の有糸分裂のデモンストレーションを図1に示す。
図1:タマネギの根の有糸分裂
アセトカルミンは、他の核酸染色剤(アセトオルセインなど)に比べて毒性が弱く、また安価です。
また、他の染色剤に比べ安価です。
結論
顕微鏡観察では,試料中の特定の生体成分のコントラストを高めるために染色剤が使用される。
アセトカルミンは、細胞内の核酸を染色するために使用される染色剤です。
アセトカルミンは細胞質とは別に染色体を特異的に染色するため、有糸分裂の研究において染色体を可視化するために使用されることがあります。