形質転換体と組換え体の大きな違いは、形質転換体は形質転換を受けた細胞であるのに対し、組換え体は組換えDNAで形質転換された細胞である点です。
さらに、形質転換体は組換えDNAを含む場合と含まない場合があるが、組換え体は基本的に組換えDNAを含む。
また、形質転換体は抗生物質耐性によって選択されるが、組換え体は選択可能なマーカー遺伝子の発現によって選択される。
形質転換体と組換え体は、形質転換実験終了時に得られる2種類の細胞です。
主な対象分野
- トランスフォーマントとは
– 定義、特徴、選択 - 組換え体とは
– 定義、特徴、選択 - 形質転換体と組換え体の類似点とは?
– 共通する特徴の概要 - 形質転換体と組換え体の違いとは?
– 主な違いの比較
この記事の重要な単語
ブルーホワイトスクリーニング、DNAクローニング、非組換え体、組換え体、選択マーカー、形質転換体
トランスフォーマーとは
形質転換体とは、形質転換を受けた細胞(特にバクテリア)のことです。
一般に、形質転換はDNAクローニングの主要なステップであり、目的とするDNAのコピーを大量に生産する役割を担っている。
形質転換のためのDNAを調製するために、目的の遺伝子はクローニングベクターまたは発現ベクターに挿入される。
ここで、制限酵素はベクターDNAを直鎖化し、リガーゼ酵素はベクターの適合する末端をライゲーションする。
しかし、ライゲーション後のベクターには、インサートが含まれている場合と含まれていない場合があります。
基本的に組換えベクターとは、このインサートが入ったベクターを指す。
そして、これらのベクターは宿主細菌に形質転換される。
最後に、形質転換されたDNAを持つ細菌を選択する必要がある。
そのために、これらの細菌は特定の抗生物質を含む培地で培養される。
しかし、ベクターDNAには、対応する抗生物質に対する耐性遺伝子が含まれている。
そのため、形質転換した細菌は、その培地で生育することができる。
一方、非形質転換体は培地で生育することができません。
リコンビナントとは
組換え体とは、組換えプラスミドを持つ形質転換体のことである。
一般に、すべての形質転換体は対応する抗生物質を添加した培地で生育できるが、そのすべてが組換え体というわけではない。
さらに、インサートを含まない非組換え体も存在する。
したがって、非組み換え体にはクローニングベクターしか含まれていない。
また、選択培地でも生育可能である。
また、リコンビナントと非リコンビナントを識別する方法が必要である。
図2:組換え体と非組換え体
一般に、組換え体のスクリーニングには、青白色コロニー選抜が用いられる。
ここで、プラスミドベクター上のβ-ガラクトシダーゼ遺伝子の配列に外来DNAが挿入される。
このため、組換え体では、この挿入によりβ-ガラクトシダーゼ遺伝子の発現が阻害される。
しかし、非組み換え体では、β-ガラクトシダーゼ遺伝子がそのまま残っているため、この酵素がX-galを青色生成物に変換している。
そのため、非組み換え株は青色コロニーを形成する。
トランスフォーマーとリコンビナントの類似性
- 形質転換実験の結果得られる細胞には、「形質転換体」と「組換え体」の2種類があります。
- 形質転換に成功した細胞です。
- 両者とも形質転換されたクローニングベクターを含んでいます。
- また、両者とも抗生物質耐性を有し、選択培地で生育する。
トランスフォーマントとリコンビナントの違い
定義
形質転換体とは、外来DNAを取り込んで遺伝子を変化させた細胞を指し、組換え体とは、異なる起源を持つ遺伝物質が結合した細胞を指す。
これが、形質転換体と組換え体の大きな違いです。
意義
形質転換体が形質転換を受けた細胞であるのに対して、組換え体は組換えプラスミドで形質転換された細胞です。
プラスミドの種類
形質転換体と組換え体のもう一つの違いは、形質転換体がクローニングベクターまたは組換えベクターを含むのに対し、組換え体は組換えベクターを含むことです。
注目遺伝子の封じ込め
形質転換体は形質転換の目的遺伝子を含んでいてもいなくてもよく、組換え体は形質転換の目的遺伝子を含んでいてもよい。
選択方法
さらに、形質転換体の選択は抗生物質耐性によるものであり、組換え体の選択は選択可能なマーカー遺伝子の発現によるものである。
結論
形質転換体は、追加のDNAを取り込んだ細胞です。
一般に、この追加のDNAは、抗生物質耐性の遺伝子をコード化したクローニングベクターであることがあります。
そのため、対応する抗生物質を含む培地で生育する。
一方、組換え体は、組換えDNAを取り込んだ細胞です。
細胞内に外来遺伝子を発現させながら、抗生物質耐性を発揮する。
したがって、組換え体は、選択マーカーを発現するかどうかで、形質転換体から選択することができる。
しかし、形質転換体と組換え体の主な違いは、組換えDNAの有無です。