グラム染色と酸ファストステインの大きな違いは、グラム染色は細胞壁の種類が異なる細菌を区別するのに役立つのに対し、酸ファストステインは細胞壁にワックス状のミコール酸を持つグラム陽性細菌を区別するのに役立つという点です。
また、グラム染色ではグラム陽性菌がクリスタルバイオレット染色を保持して紫色に見えるのに対し、酸ファスト染色では酸ファスト菌がカルボフクシン染色を保持して赤色に見える。
グラム染色と酸ファスト染色は、細菌の性状を調べるために用いられる2種類の細菌学的な染色法です。
グラム染色とは
グラム染色は、細菌の2つの大きなグループを区別するために使用される一般的な差分染色法の一種です。
グラム陽性菌とグラム陰性菌の2つの大きなグループを区別するために用いられる、一般的な差分染色法です。
デンマークの微生物学者ハンス・クリスチャン・グラムが1884年にこの染色法を開発した。
グラム染色に用いられる細菌の特徴は、細胞壁にペプチドグリカンが存在することである。
したがって、細胞壁にペプチドグリカンを持つ細菌をグラム陽性菌、細胞壁にペプチドグリカンを持たない細菌をグラム陰性菌と特徴付ける。
図1:グラム染色
グラム染色の手順は以下の通りです。
- 熱固定した細菌塗抹標本に一次染色剤であるクリスタルバイオレットを塗布する。
- 媒染剤としてグラムヨウ素を添加する。ここで、媒染剤はトラップ剤として作用し、染色を安定化させる役割を担っている。一般に、細胞壁のペプチドグリカンの厚い層にクリスタルバイオレットとヨウ素の複合塊が形成されることに関与する。これにより、グラム陽性菌は紫色に発色する。
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- エタノールやアセトンエタノール溶液などの脱色剤の添加により、薄いペプチドグリカン層に残った色素を洗い出す。これにより、グラム陰性菌は無色になる。
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- サフラニンによる対比染色で、脱色された細胞をピンク色に染める。
最後に、グラム陽性菌の細胞やクリスタルバイオレットで染色した細胞は紫色に、グラム陰性菌の細胞やサフラニン染色した細胞は赤色にスミアに写ります。
アシッドファーストステインとは
アシッドファスト染色とは、細胞壁にワックス状のマイコール酸を持つグラム陽性菌を区別するための染色法の一種である。
酸ファスト染色には、Ziehl-Neelsen法とKinyoun法の2つの方法があります。
2つの酸菌染色法の主な違いは、一次染色の際に熱を使うかどうかです。
Ziehl-Neelsen法では、熱を利用して一次染色を酸菌細胞に浸透させる。
しかし、金雲法では熱を用いない。
さらに、酸ファスト染色の一般的な手順は以下の通りです。
- 細菌塗抹標本に一次染色剤であるカルボルフクシンを塗布する。ここで、ワックス状の酸ファスト細胞はカルボルフクシンによる赤色を保持する。
- 酸・アルコール溶液を主成分とする脱色剤を塗布する。重要なことは、脱色後も一次染色が酸菌体に残存していることです。
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- メチレンブルーで対比染色する。
したがって、最終的には、酸ファスト細胞やカルボルフクシン染色された細胞は赤色に、非酸ファスト細胞やメチレンブルー染色された細胞は青色に見えることになる。
グラム染色と酸洗いの類似点
- グラム染色とアシッドファスト染色は、細菌の染色に用いられる2種類の鑑別染色法です。
- どちらもグラム陽性菌を特徴づけることができる。
- また、どちらも染色時に複数の染色剤を使用する。そのため、染色したサンプルに生物が2色で現れる。
- また、どちらの染色法も臨床の場で病気の診断に用いられている。
グラム染色と酸性の速さの違い
定義
グラム染色とは、細菌を予備的に同定するための染色法で、紫色の色素を塗布した後、脱色剤で着色し、さらに赤色の色素を塗布する染色法をいい、酸菌染色とは、マイコバクテリウム属などの酸菌の同定に用いる分画染色をいいます。
これがグラム染色と酸ファストステインの大きな違いです。
意義
グラム染色は、細菌を2つの大きなグループに分類するために用いられる一般的な手法であり、酸ファスト染色はグラム陽性細菌を区別するために用いられる手法です。
特徴
グラム染色が異なる種類の細胞壁を持つ細菌を特徴づけるのに対し、酸ファスト染色は細胞壁にマイコリック酸を持つ細菌を特徴づける。
したがって、この点もグラム染色と酸ファストステインの違いです。
プライマリーステイン
グラム染色ではクリスタルバイオレットを、酸菌染色ではカルボフクシンを主染料として使用します。
媒染剤
媒染剤もグラム染色と酸ファスト染色の違いです。
グラム染色ではヨウ素を媒染剤として使用するが、酸ファスト染色では媒染剤を使用しない。
カウンターステイン
グラム染色と酸ファストステインのもう一つの違いは、対比染色です。
グラム染色ではサフラニンが、酸ファスト染色ではメチレンブルーが対極染色として用いられる。
差別化
さらに、グラム染色は細菌をグラム陽性とグラム陰性に区別するのに対し、酸ファスト染色はグラム陽性菌を酸ファスト菌と非酸ファスト菌に区別する。
これもグラム染色と酸ファスト染色の違いの一つです。
登場
また、グラム染色では、グラム陽性菌は青色に、グラム陰性菌は赤色に見える。
一方、酸菌染色では、酸菌は赤色に、非酸菌は青色に見える。
結論
グラム染色は、グラム陽性菌とグラム陰性菌の区別に用いられる主要な細菌学的染色法の一つです。
クリスタルバイオレットを主染料とし、サフラニンを対向染色とする鑑別染色法です。
一方、酸ファスト染色もグラム陽性菌、特にマイコバクテリウム属の細菌を特徴付けるために用いられる差延染色法です。
カルボフクシンを主染色とし、メチレンブルーを対極染色として用いる。
しかし、グラム染色と酸性の高速染色との主な違いは、特徴づけの種類です。