一過性トランスフェクションと安定性トランスフェクションの大きな違いは、一過性トランスフェクションでは外来遺伝子がゲノムに組み込まれないのに対して、安定性トランスフェクションでは外来遺伝子がゲノムに組み込まれることである。
また、一過性感染では遺伝子の発現が短期間で行われるのに対し、安定性感染では外来遺伝子が世代交代することにより、遺伝子の発現が長期間に渡って行われる。
真核細胞に外来遺伝子を導入する方法として、一過性のトランスフェクションと安定性のトランスフェクションの2つがあります。
一般に、どちらのタイプのトランスフェクションも、バイオテクノロジーにおいて重要な用途があります。
主な対象分野
- トランジェントトランスフェクションとは
– 定義、方法、重要性 - 安定型トランスフェクションとは
– 定義、方法、重要性 - 一過性トランスフェクションと安定性トランスフェクションの類似点とは？
– 共通点の概要 - 一過性トランスフェクションと安定性トランスフェクションの違いとは？
– 主な違いの比較
この記事の重要な単語
遺伝子発現、ゲノム統合、レポーター遺伝子、安定的トランスフェクション、一過性トランスフェクション
トランジェントトランスフェクションとは
一過性のトランスフェクションとは、外来遺伝子を細胞内に導入するが、ゲノムには組み込まないトランスフェクションの一種である。
従って、外来遺伝子は真核細胞内で複製されることはない。
従って、細胞分裂によって希釈されながら、時間の経過とともに劣化していく。
このように、一過性の遺伝子導入は、短期間の遺伝子発現を可能にすることが大きな特徴である。
また、一般的に遺伝子導入に用いるベクターにはレポーター遺伝子が含まれており、真核細胞内での外来遺伝子の発現をモニタリングすることが可能です。
また、レポーター遺伝子により、細胞内における外来遺伝子の存在をモニターすることができる。
安定したトランスフェクションとは
安定型トランスフェクションとは、外来遺伝子が染色体または染色体外エピソームに組み込まれることにより、真核細胞のゲノムに組み込まれるトランスフェクションの一種である。
したがって、安定型トランスフェクションの最大の特徴は、外来遺伝子を世代を超えて受け継ぐことができる点です。
また、ゲノムに組み込まれることで、外来遺伝子が細胞内で長期間持続するため、「高い遺伝子発現が安定的に得られる」。
図2: 安定したトランスフェクション
さらに、安定型トランスフェクションの統合コンストラクトには、ゲノムへの統合の成功や遺伝子発現のレベルを識別するための選択性メーカーが含まれている。
一過性のトランスフェクションと安定したトランスフェクションの類似性
- 真核細胞に外来遺伝子を導入する方法として、一過性のトランスフェクションと安定性のトランスフェクションがあります。
- どちらの方法でも、外来遺伝子の発現は起こります。
- また、これらの方法は、バイオテクノロジーにおいて異なる用途を持っています。
一過性のトランスフェクションと安定したトランスフェクションの違い
定義
一過性のトランスフェクションとは、真核細胞のゲノムに外来DNAを組み込まないトランスフェクションのことであり、安定性のトランスフェクションとは、真核細胞のゲノムに外来DNAを組み込むトランスフェクションのことである。
このように、一過性のトランスフェクションと安定したトランスフェクションの主な違いを説明する。
アッセイに要した時間
さらに、一過性のトランスフェクションアッセイでは3～4週間、安定したトランスフェクションでは12～18週間を要するとされています。
遺伝子の変化
一過性のトランスフェクションでは真核生物細胞に変化はないが、安定したトランスフェクションでは真核生物細胞に永続的な遺伝的変化が生じる。
子孫への引き継ぎ
さらに、一過性のトランスフェクションでは、外来DNAを世代を超えて受け継ぐことはできないが、安定したトランスフェクションでは、外来DNAを世代を超えて受け継ぐことができる。
遺伝子発現期間
一過性のトランスフェクションでは24～96時間までの短時間に、安定性のトランスフェクションではより長い期間、遺伝子を発現させることができます。
表現レベル
一過性のトランスフェクションでは比較的低い発現量ですが、安定したトランスフェクションでは高い発現量で安定しています。
コスト
一過性のトランスフェクションと安定したトランスフェクションのもう一つの違いは、一過性のトランスフェクションが比較的安価であるのに対し、安定したトランスフェクションは高価であることである。
アプリケーション
一過性のトランスフェクションは、小規模なタンパク質生産、遺伝子ノックダウンアッセイなどの短期的な遺伝子発現研究に重要であり、安定したトランスフェクションは、長期の遺伝子制御、大規模なタンパク質生産、安定した細胞株の生成、遺伝子治療などに重要です。
結論
一過性のトランスフェクションとは、簡単に言えば、外来遺伝子が真核細胞のゲノムに組み込まれないトランスフェクションの一種である。
従って、外来遺伝子が細胞の世代を超えて受け継がれることはない。
さらに、このタイプのトランスフェクションでは、外来遺伝子を短期間しか発現させることができない。
一方、安定型トランスフェクションは、外来遺伝子が真核細胞のゲノムに永続的に組み込まれるトランスフェクションの一種である。
従って、外来遺伝子は何世代にもわたって細胞に受け継がれる。
また、外来遺伝子の発現は、より長い期間にわたって行われる。
したがって、一過性のトランスフェクションと安定したトランスフェクションの主な違いは、外来遺伝子が真核細胞のゲノムに統合されるかどうかです。
