注液プレートと展開プレートの大きな違いは、注液プレートは溶かした寒天を植菌体に流し込むのに対し、展開プレートは固まった寒天の表面に植菌体を撒くことである。
接種物とは、栄養寒天の中や上で増殖する微生物、細菌、菌類を指す。
注液プレートと展開プレートは、細菌サンプルの定量を行う2つの手法です。
どちらもペトリ皿と栄養寒天を必要とします。
一般に、液体試料中に存在するコロニー形成細菌の数を数える方法は、pour plateです。
また、プレートは、細菌を好気性、嫌気性、通性好気性に同定することができる。
一方、スプレッドプレートでは、特定のクローン性コロニーを分離することができる。
Pour Plateとは
シャーレに植菌液を流し込む前に、冷却して溶かした培地と混ぜ合わせて作るプレートです。
液体試料中に存在するコロニー形成細菌の数を数えるのに適した方法です。
滅菌済みシャーレの中央に試料を一定量植え付け、冷却した溶融寒天培地を流し込み、よく混ぜる。
固化後、プレートを反転して培養することができる。
注液プレート法では、細菌は表面だけでなく、培地内でも増殖する。
培地内は酸素不足のため、小さなコロニーが出現する。
コロニー1個がコロニー形成単位(CFU)に相当するため、プレート内のコロニーを数えることができる。
スプレッドプレートとは
スプレッドプレートとは、寒天の表面にある細菌のコロニーを数えたり分離したりする手法です。
固まった寒天の上に少量の植菌液を流し、スプレッダーを使って広げることができる。
ここで、スプレッダーは試料中の細菌を死滅させる可能性があるため、あまり高温にならないようにする。
注液プレート法で作製した細菌コロニーを図1に示す。
図1:バクテリア・コロニー
スプレッドプレートの菌の増殖は、プレートの表面にのみ発生する。
そのため、スプレッドプレート法では、よく分離されたコロニーが得られ、数を数えるのも拾うのも簡単です。
サンプルの希釈度は、分離の良いコロニーを得るための重要な要素です。
注水板と展開板の類似点
- 注液プレートと展開プレートは、細菌を定量的に増殖させるために用いられる手法です。
- どちらのプレートも栄養寒天とペトリ皿が必要です。
- 両者とも栄養寒天培地とシャーレを用意し、接種後、培養して細菌の増殖を確認します。
Pour PlateとSpread Plateの違い
定義
注ぐプレート。
シャーレに接種する前に、冷却されたがまだ溶けている培地と混合して作成されたプレート。
スプレッドプレート。
寒天培地の表面にある細菌のコロニーを数える、または分離するために使用される手法。
準備
シャーレに注ぐ。
溶融寒天をシャーレに入れた接種物の上に注ぎ、静かに振り混ぜる。
スプレッドプレート 接種菌を固化した寒天の上にスプレッダーで広げる。
植菌量
プレートを注ぐ。
スプレッドプレート 0.1 ml
コロニーの成長
プレートを注ぐ。
スプレッドプレート 培地表面のみ
成長分野
注水板。
スプレッドプレート。
目的
プレートへの注入。
サンプル中のコロニー形成菌の数を数える。
スプレッドプレート 特定のクローン性コロニーを分離する
メリット
注水プレート。
スプレッドプレート。
デメリット
プレートへの注入。
コロニーを選ぶ際に、他のコロニーを邪魔する可能性がある。
スプレッドプレート 微好気性菌の生育ができない
結論
注液板は、試料中の細菌のコロニー形成単位を定量化することができる手法です。
溶かした栄養寒天を植菌体に流し込むことで作製する。
スプレッドプレートは、クローン性コロニーを分離するのに役立つ。
固化した寒天培地に接種菌を広げて作製する。
注液プレートと展開プレートの主な違いは、その目的と調製方法です。