間接法とサンドイッチ法の違いとは？分かりやすく解説!

間接法とサンドイッチ法の主な違いは、間接法では検出したいタンパク質を含む試料をマイクロタイタープレートに塗布するのに対し、サンドイッチ法ではこのプレートに一次抗体を塗布する点です。

また、サンドイッチ法は間接法より2～5倍感度が高い。

間接法とサンドイッチ法は、固相酵素免疫測定法（EIA）であるELISA（酵素結合免疫吸着測定法）の2つの方法です。

これらは比較的感度の高い方法であり、また、より迅速で再現性の高い方法です。

間接法 ELISA とは

間接法 ELISA とは、2段階の ELISA の一種で、2種類の抗体を用いて試料中の特定タンパク質の検出・定量を行うものです。

間接法 ELISA の手順は以下の通りです。

一般に、間接免疫測定法は、病原性抗原に対して体内で産生される抗体を定量することにより、細菌、ウイルス、寄生虫の感染症を診断するのに適した方法です。

ここで、間接法では、二次抗体としてポリクローナル抗体を用いることができる。

したがって、より経済的です。

一方、一次抗体の種類と数を変えて、標的タンパク質と結合させることができます。

したがって、間接法 ELISA は、それぞれより柔軟で、より高感度な標的タンパク質の検出法であるといえます。

サンドイッチELISAは、一次抗体と酵素結合二次抗体を用いて検出する、二段階免疫測定法のもう一つのタイプです。

一次抗体と二次抗体の間に目的タンパク質を挟み込むことが大きな特徴です。

サンドイッチ ELISA の手順は以下の通りです。

サンドイッチ法は、低分子量から高分子量までのタンパク質の検出に適しています。

また、直接法、間接法に比べ、2～5倍の感度があります。

また、2種類の抗体で標的タンパク質を捕捉するため、より特異的な方法です。

間接法とは、一次抗体と標識二次抗体の結合過程を2回行うELISAで、サンドイッチ法とは、一次抗体と二次抗体の間に目的タンパク質を挟み込む2回法のELISAを指します。

これが間接法とサンドイッチ法の主な違いです。

間接法では、マイクロタイタープレートのコーティングはタンパク質を含む試料であり、サンドイッチ法では、コーティングは一次抗体です。

二次抗体は、間接法 ELISA では一次抗体と結合し、サンドイッチ法 ELISA では二次抗体が目的タンパク質と結合します。

間接法とサンドイッチ法のもう一つの違いは、間接法が高感度であるのに対し、サンドイッチ法は間接法の2～5倍の感度を持つことです。

間接法は試料中の全抗体濃度を測定するのに適していますが、サンドイッチ法は複雑な試料を分析するのに適しています。

したがって、この点も間接法とサンドイッチ法の違いとなります。

間接法 ELISA は、マイクロタイタープレート上の目的タンパク質に一次抗体を結合させ、酵素結合二次抗体で検出する二段階法 ELISA の一種である。

一方、サンドイッチELISAは、マイクロタイタープレートに塗布された一次抗体に目的タンパク質が結合し、その後、酵素結合二次抗体で検出される二段階のELISAです。

従って、間接法とサンドイッチ法の主な違いは、手順の順序にある。