遊走と浸潤の主な違いは、遊走アッセイが通常の細胞の動きを測定するのに対し、浸潤アッセイは細胞外マトリックスを介した細胞の移動を測定することである。
さらに、移動アッセイではフィルターを使用しないのに対し、浸潤アッセイではコラーゲンやエラスチンなどの細胞外マトリックス(ECM)の分子をフィルターとして使用する。
Migration assayとInvasion assayは、細胞の動きを解析する2種類の方法です。
細胞移動は、がん、関節炎、動脈硬化など様々な疾患の進行に重要な多段階のプロセスであり、細胞侵入は、ECMの分解とタンパク質分解による細胞の移動を含むものです。
マイグレーションアッセイとは
マイグレーションアッセイは、特定の化学的刺激に対する細胞の動きを測定する方法です。
細胞の移動は生きている細胞の重要な特性であり、胚の発生や進行、免疫反応の発達、癌の転移、関節炎、動脈硬化、炎症などのいくつかの疾患状態において重要な側面を持っています。
図1:寒天平板法
さらに、寒天平板法は移動アッセイの一例です。
寒天やゼラチンからなる半固体状のマトリックスを用い、その中を細胞が移動することを想定している。
この場合、細胞と標的化学物質はマトリックス上のウェルに別々に配置することができる。
較正された培養時間の後、移動方向の前方から陽性応答細胞をカウントすることができる。
例えば、PP法では、細胞は標的化学物質に向かって作られた平行な流路を移動する。
このとき、細胞は3つ以上のチャンネルを切れ目でつないで移動しなければならない。
インベイジョンアッセイとは
侵襲アッセイは、細胞の移動を解析するために用いられる、より高度な方法です。
これらのアッセイにおける最も重要な特徴は、細胞外マトリックスの分子を含むフィルターを使用することである。
これらの分子はコラーゲン、エラスチンなどであり、それゆえ、フィルターは細胞外マトリックスを表している。
ボイデン室、ブリッジ室、毛細管法などの2室法は、浸潤アッセイの一例です。
また、これらのチャンバーは、ボイデンが先駆的に構築したものです。
いずれの方法も、2つのチャンバーは上記のフィルターで仕切られている。
一方に細胞を入れ、もう一方に化学物質を入れる。
これらの方法のほかにも、化学刺激に対する細胞の反応を測定するためのプロトコルは多岐にわたる。
マイグレーションとインベイジョンアッセイの類似性
- MigrationとInvasion Assayは、異なるタイプの細胞の動きを分析する方法です。
- 特定の化学的刺激に反応した細胞の動きを調べる。
- 真核細胞、原核細胞のいずれも検査可能です。
- また、いずれも細胞の動きを定性・定量的に測定することができる。
- さらに、両者とも品質管理上、インキュベーション時間の決定が重要です。
- さらに、両者とも創薬において重要な役割を担っている。
Migration Assay と Invasion Assay の違い。
定義
Migration assayは特定の刺激による細胞の移動を測定する方法であり、Invasion assayは細胞外マトリックスを介した細胞の移動を測定する方法です。
この点が、migration assayとinvasion assayの大きな違いです。
意義
細胞遊走は多段階のプロセスであるのに対し、細胞浸潤はECMの分解とタンパク質分解に関与している。
従って、この点は遊走と浸潤のアッセイのもう一つの違いです。
フィルタの使用
フィルターの使用もmigration assayとinvasion assayの違いの一つです。
移動測定ではフィルターを使用しないが、浸潤測定ではECMの分子を含むフィルターを使用する。
例
寒天平板法は移動測定法の一例であり、ボイデンチャンバー、ブリッジチャンバー、キャピラリー法などの2チャンバー法は侵入測定法の一例です。
結論
遊走・浸潤アッセイは、いずれも細胞の動きを測定する走化性アッセイです。
Migration assayは、特定の化学的刺激に対する細胞の動きを解析する方法です。
これに対して、浸潤アッセイは、コラーゲンやエラスチンなどのECMの分子をフィルターにして起こる細胞の動きを解析する、より高度な解析方法です。
しかし、migration assayでは、このようなフィルターを通した細胞の移動は起こらない。
したがって、遊走と侵入のアッセイの大きな違いは、ECMに相当するフィルターを使用するか否かにある。