主な違い – 分析用遠心分離機と分取用遠心分離機
遠心分離は、遠心力を利用して不均質な混合物を沈降・分画する分離法です。
遠心分離の種類には、使用する量と速度から微量遠心分離、高速遠心分離、超遠心分離の3種類があります。
超遠心法は、遠心分離の中でも最大角速度を利用した方法です。
超遠心法の回転速度は 1,000 000g と速いため、リボソームやタンパク質、ウイルスなどの微粒子の分離に使用されます。
超遠心分離法には、分取法と分析法があります。
分取遠心法と分析遠心法の主な違いは、分取遠心法が膜、オルガネラ、ウイルス、DNA、RNA などの微小物質のペレッティングに用いられるのに対し、分析遠心法はタンパク質複合体などの高分子の質量や形、分子の沈降速度などを測定するために用いられます。
分取遠心分離とは
分取遠心法とは、微小な粒子の分離に用いる高速遠心機を指します。
ウイルス、ウイルス粒子、タンパク質複合体、タンパク質、リポタンパク質、RNA、プラスミド DNA などの微小粒子を分離することができます。
図1に Beckman-Coulter 社製分取遠心分離機のロータ内部を示しました。
図1 Beckman-Coulter 社製分取遠心機
分取遠心法は密度勾配遠心法としても用いることができます。
ショ糖勾配は、細胞小器官の分離に使用することができます。
核酸の分離にはセシウム勾配を使用することができます。
分析用遠心分離機とは？
分析用遠心分離機とは、分析工程で使用される高速遠心分離機を指します。
サブユニットの全体形状、構造変化、化学量論などを知ることで、特定の試料に含まれる分子の種類に関する情報を得るために使用されます。
また、粒子の沈降速度の測定にも使用することができます。
図2に超遠心機の外観を示します。
図 2 超遠心機 Beckman Coulter Optima LE-80K
分析用遠心分離機には光学検出器が付属しており、試料の回転をリアルタイムでモニターすることができます。
分析用遠心分離機で行う実験は、主に沈降速度実験と沈降平衡実験に分けられます。
分取と分析遠心分離の類似点
- 分取法、分析法ともに 100 万 g などの高速で行う超遠心分離法の一種です。
- 分取遠心法、分析遠心法とも、微小な粒子を分離するために使用されます。
分取と分析の遠心分離の違い
定義
Preparative Centrifugation（調製用遠心分離機）。
微小な粒子の分離に用いる高速遠心分離機を指す。
分析用遠心分離機。
分析用遠心分離機は、分析工程で使用される高速遠心分離機を指します。
分析手順
調製用遠心分離機 分取遠心：分取遠心は分析操作に使用できません。
分析用遠心分離機。
分析用遠心分離機は、分析用として使用します。
サンプルの種類
分取遠心。
膜、オルガネラ、ウイルス、プラスミド DNA、RNA などの微小物質のペレッティングに使用されます。
分析用遠心分離機。
タンパク質複合体などの高分子の質量や形状、分子の沈降速度などを測定するために使用されます。
サンプル量
プレパラート遠心分離。
試料量が多い場合、分取遠心で処理することができます。
分析用遠心分離機。
分析用遠心分離機では、少量のサンプル（1mL以下）のみ処理可能です。
試料の純度
調製用遠心分離機。
純度の低い試料は、分取遠心で使用することができます。
分析用遠心分離機。
分析用遠心分離では、比較的純度の高い試料を使用します。
沈降係数と分子量
分取遠心法。
分取遠心法により、沈降係数および分子量を測定することができます。
分析用遠心分離機。
分析遠心法では、正確な沈降係数と分子量を求めることができます。
光学読み出し
プレパラティブ遠心分離法。
分取遠心：運転終了後にフラクションを回収することができ、運転中の光学的読み出しはありません。
分析用遠心分離機。
分析用遠心分離：分析用遠心分離では、遠心分離の進行状況を目視で確認することができます。
冷却の仕組み
遠心分離の準備。
分取遠心：分取遠心に冷却装置は使用しません。
分析用遠心分離機。
分析用遠心分離機：高速回転のため発熱が大きいので、冷却装置を使用する。
機械の種類
分取遠心機。
L5-65 および L5-75 は分取遠心に使用されます。
分析用遠心分離機。
分析用遠心分離機は Beckman の E 型を使用しています。
結論
高速遠心分離を利用した超遠心分離法には、分取遠心分離と分析遠心分離の 2 種類があります。
分取遠心法は、リボソーム、プラスミド DNA、RNA などの微粒子を分離するために用いられます。
しかし、分析用遠心分離機は主に試料の分析的な測定値を得るために使用されます。
分取遠心と分析遠心の大きな違いは、試料を処理する際にそれぞれの遠心分離を行う目的です。
